人NK细胞分离试剂盒（负选）
91-01-0010
产品简介
NK细胞是人体免疫的道防线，具有非限制性杀伤的特点，能够对感染和肿瘤细胞起到快速杀伤作用。NK细胞仅占外周血的5-10%，细胞表面表达CD16及CD56标志物。本产品能够从新鲜或冻存的外周血单个核细胞中简便快捷的分选出较高纯度的NK细胞。能够处理的总细胞量为1×109，为基础和临床研究使用NK细胞提供一个有力的工具。
预期用途
适用于从人外周血、浓缩白细胞来源的单个核细胞等单细胞悬液中分选出NK细胞。
产品信息
中文名称 | 人NK细胞分离试剂盒（负选） |
英文名称 | Human NK cell isolation kit（Untouchable selection） |
货号 | 91-01-0010 |
细胞处理量 | 用于处理1×109个细胞 |
分选方法 | 负选 |
试剂盒组成
成分名称 | 物理性状 | 规格 | 数量 |
混合生物素化抗体（NK Cell） | 无色透明液体 | 1mL/支 | 1支 |
链霉亲和素磁珠 | 棕色混悬液 | 1mL/支 | 1支 |
细胞分选缓冲液 | 无色透明液体 | 500mL/瓶 | 1瓶 |
保存方式
生物素化抗体、链霉亲和素磁珠及细胞分选缓冲液均置于2-8°C保存，有效期为12个月；生产日期，有效期至：见标签。
操作步骤
1、 单个核细胞的提取
分离外周血单个核细胞(推荐欣协生物快速单个核细胞分离管，货号91-01-0002),详细使用方法参见单个核细胞分离管说明书。
2、 NK细胞分离详细步骤（负选）
1. 往PBMC中加入适量（推荐每1×108cells使用50mL）预冷的细胞分选缓冲液用以洗涤PBMC，300g离心8min；
2. 弃上清，加入适量预冷的细胞分选缓冲液，将PBMC浓度调整为1×108cells/mL，冰浴或4°C预冷5min；
3. 以100μL生物素化抗体/mL PBMC的比例将混合生物素化抗体加入PBMC中，用移液枪轻柔吹打20次或涡旋震荡5S，充分混合后置于4°C孵育15min；
4. 孵育完毕后，加入细胞分选缓冲液，300g离心8min；
5. 弃上清，使用细胞分选缓冲液将PBMC浓度调整为108/mL；
6. 以100μL磁珠/mL PBMC的比例将链霉亲和素磁珠加入到PBMC中，用移液枪轻柔吹打20次混匀，室温静置孵育10min；
7. 孵育完毕后，加入2.5mL细胞分离缓冲液混匀后使用磁极磁吸3min收集未被磁吸液体于新的离心管中；
8. 重复步骤7一到两次；
9. 将收集未磁吸液体300g离心8min去上清，所得沉淀即为目的细胞即可用于下游分析及应用。
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