新品 | 人NK细胞分选试剂盒
日期：2025-04-07 阅读：
产品描述
分选原理
根据说明书建议，首先用生物素化的单克隆抗体混合物对细胞进行标记。随后，用抗生物素磁珠对细胞进行间接磁性标记。然后将细胞悬液加载到分选柱上，该分选柱置于分选器的磁场中。磁性标记的非靶细胞保留在柱中，而未标记的靶细胞则通过，从而实现非靶细胞的去除与靶细胞的收集。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
●缓冲液:配制含有pH7.2 PBS、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2mMEDTA的溶液。
●分选磁极、分选磁力架、细胞分选柱
操作步骤
一、样本准备
人血样本（新鲜样本）处理时，使用密度梯度离心制备PBMC细胞悬液，制备完成的细胞悬液保存在2-8℃中。
二、细胞分离步骤
1.PBMC细胞浓度调整为1X108cells/mL，离心管中加入要分选的细胞悬液（注：根据离心管的容量加入适量的细胞悬液）。
2.以200μL抗体/mL PBMC细胞的比例将人NK混合抗体加入细胞悬液中，用移液枪轻柔吹打或涡旋震荡5S，充分混合后2~8℃孵育5min。
3.抗体孵育完成后，以200μL链霉亲和素磁珠/mL PBMC细胞的比例将链霉亲和素磁珠加入步骤2的细胞悬液中，用移液枪轻柔吹打或涡旋震荡5S，充分混合后2~8℃孵育2min(注:磁珠使用之前请涡旋振荡或吹打混匀)。
4.磁珠孵育完成后，加入适量的分选缓冲液，将离心管中的细胞悬液配至0.5~5mL体系。（注：根据分选的细胞体系决定分选缓冲液的量，如：分选 1×107cells时，可将细胞悬液加至0.5mL体系进行磁分选）。
5.组装好磁力分选套装，分选柱提前用分选缓冲液进行一次润洗，取新的离心管放在分选柱下面，将细胞悬液加入细胞分选柱中，进行细胞分选（注：根据分选的细胞体系大小决定使用的细胞分选柱）。
6.细胞悬液液体流尽之后，加入0.5ml~2mL的分选缓冲液进行清洗，重复3 次。（注：分选缓冲液加入量根据分选柱和分选体系决定）
7.滴下来的液体即为未标记的富集得到的人NK细胞（注：细胞分选柱中带有磁珠的细胞为非人NK细胞）。
分选效果
从人 PBMC 中分选 NK 细胞，分选前后的细胞用 APC anti-human CD3、PE anti-human CD56 标记后 进行流式分析，分选前后的 NK 细胞纯度分别为 17.24%和 94.59%。
储存条件
2-8℃避光保存，请勿冷冻。有效期12个月。
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