新品 | 人多发性骨髓瘤CD138分选磁珠
日期:2025-01-20 阅读:
产品描述
多发性骨髓瘤CD138磁珠是通过全自动分离器或全血柱试剂盒直接从抗凝的骨髓或全血中阳性选择CD138+细胞而开发的。不需要样品制备,包括密度梯度离心法或红细胞裂解法。CD138抗原,也被称为syndecan-1,主要在骨髓中的正常和恶性浆细胞上发现。初始B细胞、生发中心B细胞、记忆B细胞、T细胞或单核细胞不表达CD138抗原。
分选原理
首先,用多发性骨髓瘤CD138磁珠对骨髓或全血样本中CD138+细胞进行磁性标记。然后,将细胞悬浮液装入置于分选器磁场的分选柱中。磁性标记的CD138+细胞被保留在柱中,未标记的细胞顺着分选柱流出。将柱从磁场中移出后,磁性保留的CD138+细胞可作为正选细胞部分被洗脱出来。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
●缓冲液:配制含有pH7.2 PBS、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2mM EDTA的溶液。将缓冲液置于2-8°C。使用前对缓冲液进行脱气处理,因为空气气泡可能会堵塞分选柱。
●分选柱和分选器。
●(可选)HEPES缓冲细胞培养基(例如IMDM或RPMI1640),补充有100U/mL肝素。
●(可选)荧光偶联的抗体用于流式分析。
●(可选)PI或7-AAD可以用于流式分析中排除死细胞。
●(可选)预分离过滤器去除细胞团块。
操作步骤
一、样本准备
1.使用抽吸针从髂嵴上部或胸骨收集2–15mL骨髓,或在含有适当抗凝剂的收集管中收集多15mL静脉血。
2.处理骨髓样本时:将细胞通过预分离过滤器(100μm),以去除骨碎片或细胞团块;
3.处理全血样本时:直接进行磁性标记
二、磁珠标记
1.每1mL抗凝骨髓或全血中添加50µL多发性骨髓瘤CD138磁珠。
2.充分混合并在室温(+19−25°C)下孵育15分钟。
3.进行磁分离。
三、细胞分选
1.将LS分选柱置于相对应的分选器中。
2.用适3mL缓冲液润洗分选柱。
3.将磁性标记的细胞悬液装载到准备好的全血柱上。收集含有未标记细胞的流出液。
4.用2×2mL缓冲液清洗全血分选柱。收集流出物并与步骤3的流出物混合,这是未标记的细胞。
5.将全血分选柱从分选器中取出,并将其放在合适的收集管上。
6.将4mL全血柱洗脱缓冲液加到全血分选柱中,迅速用塞子推下,得到就是磁性标记的细胞。
7.以300×g离心细胞5分钟并去除上清液。这些细胞已准备好用于下游应用。
储存条件
2-8℃避光保存,请勿冷冻。有效期6个月。
新闻推荐
400-863-1188
地址:苏州市吴江区龙桥路1368号青禾创客1楼及3楼
邮箱:info@szxxbio.com
Copyright © 苏州欣协生物科技有限公司 版权所有
苏ICP备2022038876号