新品 | 无柱式CD4+(小鼠)细胞分选试剂盒
日期：2025-01-13 阅读：
产品描述
分选原理
根据说明书建议，首先用生物素化的单克隆抗体混合物对细胞进行标记。随后，用链霉亲和素磁珠对细胞进行间接磁性标记。然后将细胞悬液转至流式管，该流式管置于分选器的磁场中。磁性标记的细胞保留在流式管中，而未标记的细胞则倾倒流出，从而实现目的细胞与非目的细胞的分离。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
●缓冲液:配制含有pH7.2 PBS、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2mMEDTA的溶液。
●分选磁极
操作步骤
一、样本准备
测试的样本为C57小鼠脾脏。脾脏处理时，可使用单细胞悬液制备仪制备成细胞悬液，制备完成的细胞悬液保存在2-8℃中。
二、细胞分离步骤
1.细胞浓度调整为1X108cells/mL，5mL流式管中加入要分选的细胞悬液(注:单管中细胞加入量多为1X108 cells/mL)。
2.以 200μL抗体/mL细胞的比例将小鼠CD4+细胞混合抗体加入细胞悬液中，用移液枪轻柔吹打或涡旋震荡5S，充分混合后室温孵育5min。
3.抗体孵育完成后，以200μL链霉亲和素磁珠/mL细胞的比例将链霉亲和素磁珠加入步骤2的细胞悬液中，用移液枪轻柔吹打或涡旋震荡5S，充分混合后室温孵育2min(注:磁珠使用之前请涡旋振荡或吹打混匀)。
4.磁珠孵育完成后，加入适量的分选缓冲液，将流式管中的细胞悬液配至2.5mL体系。
5.将带有细胞悬液的流式管放入磁极中，磁吸附3min(注:液体完全在磁极磁场范围内)。
6.握住磁极将未结合磁珠的目的细胞倾倒入新的离心管中,即为未标记的富集得到的小鼠CD4+细胞(注:后一滴液体不要倾倒出来，对目的细胞纯度有影响)。
分选效果
从C57小鼠脾脏细胞中分选CD4+细胞，分选前后的细胞用APCanti-mouse CD3、PEanti-mouse CD4标记后进行流式分析，分选前后的T细胞纯度分别为18.32%和97.90%。
储存条件
2-8℃避光保存，请勿冷冻。有效期12个月。
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