新品 | 人CD56分选磁珠

日期:2024-06-20 阅读:

产品描述


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CD56磁珠是根据CD56抗原的表达而开发的,用于分离人源细胞。基本上所有人NK细胞都表达CD56,激活后细胞膜上的CD56密度会增加。该抗原还存在于CD3+ T细胞的一个独特亚群中,该亚群可介导非MHC限制性细胞毒性,还存在于肌母细胞、某些神经组织和肿瘤中。


分选原理

首先,用CD56磁珠对CD56+细胞进行磁性标记。然后,将细胞悬浮液装入置于分选器磁场的分选柱中。磁性标记的CD56+细胞被保留在柱中,未标记的细胞顺着分选柱流出。将柱从磁场中移出后,磁性保留的CD56+细胞可作为正选细胞部分被洗脱出来。


产品信息


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使用方法


试剂和仪器要求

●缓冲液:配制含有pH7.2PBS、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2mMEDTA的溶液。

●分选柱和分选器:CD56阳性细胞可以用xM、xL分选柱富集。强烈表达CD56抗原的细胞也可以用xM、xL分选柱去除。

●(可选)荧光偶联的抗体用于流式分析。

●(可选)PI或7-AAD可以用于流式分析中排除死细胞。

●(可选)死细胞清除试剂盒用于死细胞的清除。

●(可选)预分离过滤器去除细胞团块。


操作步骤

一、样本准备

在处理抗凝外周血或白膜层时,应使用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)。

当处理组织时,使用组织解离器制备单细胞悬浮液。


二、磁珠标记

1.细胞计数。

2.300×g离心10分钟。去除上清。

3.每107个细胞总量使用80μL缓冲液重悬。

4.每107个细胞总量添加20μL CD56磁珠。

5.混匀,2−8°C孵育15分钟。

6.每107个细胞加入1-2mL缓冲液洗涤细胞,300×g离心10分钟,去上清。

7.用500μL缓冲液重悬多108个细胞。

8.进行细胞分选步骤。


三、细胞分选

1.将分选柱置于相对应的分选器中。

2.用适当体积的缓冲液润洗分选柱(xM:500μL;xL:3mL)

3.将细胞悬液转移至分选柱中。收集流出的未标记细胞。

4.加适量缓冲液洗脱,待液体全部流尽,再加入适量缓冲液,一共洗3次。收集总流出物和第三步流出物混合。(xM:3×500μL;xL:3×3mL)

5.将分选柱从分选器中取出,并将其放在合适的收集管上。

6.加适量的缓冲液到分选柱中,迅速用塞子推下,得到就是磁性标记的细胞。(xM:1mL;xL:5mL)


储存条件


在2-8℃条件下避光保存,请勿冻存。有效期见试剂外标签。

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