新品 | 人CD56分选磁珠
日期:2024-06-20 阅读:
产品描述
CD56磁珠是根据CD56抗原的表达而开发的,用于分离人源细胞。基本上所有人NK细胞都表达CD56,激活后细胞膜上的CD56密度会增加。该抗原还存在于CD3+ T细胞的一个独特亚群中,该亚群可介导非MHC限制性细胞毒性,还存在于肌母细胞、某些神经组织和肿瘤中。
分选原理
首先,用CD56磁珠对CD56+细胞进行磁性标记。然后,将细胞悬浮液装入置于分选器磁场的分选柱中。磁性标记的CD56+细胞被保留在柱中,未标记的细胞顺着分选柱流出。将柱从磁场中移出后,磁性保留的CD56+细胞可作为正选细胞部分被洗脱出来。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
●缓冲液:配制含有pH7.2PBS、0.5%牛血清白蛋白(BSA)和2mMEDTA的溶液。
●分选柱和分选器:CD56阳性细胞可以用xM、xL分选柱富集。强烈表达CD56抗原的细胞也可以用xM、xL分选柱去除。
●(可选)荧光偶联的抗体用于流式分析。
●(可选)PI或7-AAD可以用于流式分析中排除死细胞。
●(可选)死细胞清除试剂盒用于死细胞的清除。
●(可选)预分离过滤器去除细胞团块。
操作步骤
一、样本准备
在处理抗凝外周血或白膜层时,应使用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)。
当处理组织时,使用组织解离器制备单细胞悬浮液。
二、磁珠标记
1.细胞计数。
2.300×g离心10分钟。去除上清。
3.每107个细胞总量使用80μL缓冲液重悬。
4.每107个细胞总量添加20μL CD56磁珠。
5.混匀,2−8°C孵育15分钟。
6.每107个细胞加入1-2mL缓冲液洗涤细胞,300×g离心10分钟,去上清。
7.用500μL缓冲液重悬多108个细胞。
8.进行细胞分选步骤。
三、细胞分选
1.将分选柱置于相对应的分选器中。
2.用适当体积的缓冲液润洗分选柱(xM:500μL;xL:3mL)
3.将细胞悬液转移至分选柱中。收集流出的未标记细胞。
4.加适量缓冲液洗脱,待液体全部流尽,再加入适量缓冲液,一共洗3次。收集总流出物和第三步流出物混合。(xM:3×500μL;xL:3×3mL)
5.将分选柱从分选器中取出,并将其放在合适的收集管上。
6.加适量的缓冲液到分选柱中,迅速用塞子推下,得到就是磁性标记的细胞。(xM:1mL;xL:5mL)
储存条件
在2-8℃条件下避光保存,请勿冻存。有效期见试剂外标签。
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