新品 | 人Naive CD4+ T细胞分选试剂盒II

日期:2024-05-27 阅读:

产品描述


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分选原理

根据说明书建议,首先用生物素-抗体混合物II对细胞进行标记。随后,用磁珠混合物II对细胞进行间接磁性标记。然后将细胞悬液加载到分选柱上,该分选柱置于分选器的磁场中。磁性标记的非靶细胞保留在柱中,而未标记的靶细胞,即富集的naive CD4+ T细胞通过,从而实现非靶细胞的去除与靶细胞的收集。


产品信息


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使用方法


试剂和仪器要求

●缓冲液: 含有pH7.2、0.5%BSA和 2mM EDTA 的溶液。

●选择合适的分选柱和分选器,也可以使用自动分选器进行操作。

●(可选)预分离过滤器用于去除细胞团块。


操作步骤

一、自动分选仪磁性标记、分选

1.细胞计数。

2.打开仪器,进行自动初始化。

3.转到试剂菜单并选择读取试剂。用自动分选仪上的条形码扫描仪扫描每个试剂的条形码。将试剂放入试剂架上的适当位置。

4.将样品和采集管放入冷藏架。

5.点击分选菜单,从标签子菜单中选择每个样品的名称(将自动选择正确的标记、分选和洗涤方案)。

6.将样本体积输入到体积子菜单中。按Enter键。

7.选择运行。

8.在位置 B收集浓缩的naive CD4+细胞部分是目的细胞。


二、手动磁性标记

1.准备细胞,并进行细胞计数。

2.每 107细胞,用40μL缓冲液重悬。

3.每 107细胞加10μL的生物素-抗体混合物II。

4.混合均匀,在冰箱(2-8℃)孵育5分钟。

5.每107总细胞加30μL缓冲液。

6..每107细胞加 20μL的磁珠混合物II。

7.混合均匀,在冰箱(2-8℃)孵育10分钟。

8.继续进行后续的磁性分选。


三、手动磁性分选

9.将xL柱置于合适的分选器磁场中。

10.用3mL缓冲液冲洗分选柱。

11.将细胞悬液转移到柱子上。收集通过的未标记细胞,代表富集的naive CD4+ T细胞。

12.用3mL缓冲液清洗分选柱。收集通过的未标记细胞,代表富集的naive CD4+ T细胞,并与步骤11的流出物合并。

13.(可选)将分选柱从分选器上取出,并将其放在合适的收集管上。将5mL缓冲液加到分选柱上。将柱塞快速地推入柱中,立即冲洗出磁性标记的非naive CD4+ T细胞。


四、自动磁性分选

9.仪器做好准备。

10.仪器按照用户手册中的说明进行操作。

11.建议使用 Depletes程序。在B位收集富集的naive CD4+ T细胞就是阴选部分。


储存条件


在2-8℃条件下避光保存,请勿冻存。有效期见试剂外标签。

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