新品 | 小鼠CD8a+ T细胞分选试剂盒
日期：2024-04-28 阅读：
产品描述
分选原理
根据说明书建议，首先用生物素化的单克隆抗体混合物对细胞进行标记。随后，用抗生物素磁珠对细胞进行间接磁性标记。然后将细胞悬液加载到分选柱上，该分选柱置于分选器的磁场中。磁性标记的非靶细胞保留在柱中，而未标记的靶细胞则通过，从而实现非靶细胞的去除与靶细胞的收集。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
●缓冲液:含有pH7.2、0.5%BSA和2mMEDTA的溶液。
●选择合适的分选柱和分选器，也可以使用自动分选器进行操作。
●(可选)预分离过滤器用于去除细胞团块。
操作步骤
一、自动分选仪磁性标记、分选
1.细胞计数。
2.打开仪器，进行自动初始化。
3.转到试剂菜单并选择读取试剂。用自动分选仪上的条形码扫描仪扫描每个试剂的条形码。将试剂放入试剂架上的适当位置。
4.将样品和采集管放入冷藏架。
5.点击分选菜单，从标签子菜单中选择每个样品的名称(将自动选择正确的标记、分选和洗涤方案)。
6.将样本体积输入到体积子菜单中。按Enter键。
7.选择运行。
8.在位置B收集浓缩的CD8a+ T细胞部分是目的细胞。
二、手动磁性标记
1.准备细胞，并进行细胞计数。
2.每107细胞，用40μL缓冲液重悬。
3.每107细胞加10μL的生物素-抗体混合物。
4.混合均匀，在冰箱(2-8℃)孵育5分钟。
5.每107总细胞加30μL缓冲液。
6.每107细胞加20μL的磁珠混合物。
7.混合均匀，在冰箱(2-8℃)孵育10分钟。
8.继续进行后续的磁性分选。
三、手动磁性分选
9.将xL柱置于合适的分选器磁场中。
10.用3mL缓冲液冲洗分选柱。
11.将细胞悬液转移到柱子上。收集通过的未标记细胞，代表富集的CD8a+ T细胞。
12.用3mL缓冲液清洗分选柱。收集通过的未标记细胞，代表富集的CD8a+ T细胞，并与步骤11的流出物合并。
13.(可选)将分选柱从分选器上取出，并将其放在合适的收集管上。将5mL缓冲液加到分选柱上。将柱塞快速地推入柱中，立即冲洗出磁性标记的非CD8a+ T细胞。
四、自动磁性分选
9.仪器做好准备。
10.仪器按照用户手册中的说明进行操作。
11.建议使用Depletes程序。在B位收集富集的CD8a+ T细胞就是阴选部分。
储存条件
在2-8℃条件下避光保存，请勿冻存。有效期见试剂外标签。
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