新品 | 链霉亲和素分选磁珠
日期：2024-02-04 阅读：
产品描述
链霉亲和素分选磁珠由超顺磁性磁珠与高纯度链霉亲和素共价结合而成。与生物素化抗体具有高度的特异反应，在生物领域具有广泛的应用。本产品粒径均一、形貌规整、链霉亲和素载量高、磁响应快速，利于方便、快捷地捕获目标细胞以实现磁性分离，并保证了结果的均一性和一致性。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
1.标记缓冲液（PBS，pH7.2，2mM EDTA，0.5% BSA，2-8℃）
2.分选缓冲液（pH7.2，2mM EDTA，0.5% BSA，2-8℃）
3.分选柱和分选器
4.生物素化的一抗或配体。
5.(可选)PI(碘化丙啶)或7-AAD用于流式细胞术排除死亡细胞。
6.(可选)用于去除细胞团的预分离过滤器。
7.(可选)死细胞去除试剂盒，用于去除死细胞。
操作步骤
一、样本准备
当使用抗凝外周血或白膜层时，应通过密度梯度离心分离外周血单个核细胞(PBMC)。
当处理组织时，使用标准方法制备单细胞悬浮液。
二、磁珠标记
1.细胞计数。
2.细胞离心，300g，10min，去除上清。
3.根据说明书建议重悬细胞沉淀并用生物素化抗体进行染色。
4.充分混合并在冰箱(2-8℃)中避光孵育10分钟或按照说明书的建议进行。
5.每 10⁷细胞添加1-2mL缓冲液，洗涤细胞以去除未结合的一抗，并以300Xg离心10分钟。
6.(可选)重复清洗步骤。
7.完全吸出上清液，每10⁷个总细胞加90μL缓冲液重悬细胞沉淀。
8.每10⁷总细胞添加10 μL链霉亲和素磁珠。
9.充分混合并在冰箱(2-8℃)中孵育15 分钟。
10.每10⁷细胞添加1-2mL缓冲液洗涤细胞，并以300Xg离心10分钟。
11.完全吸出上清液。
12.加500μL缓冲液中重悬细胞。
三、细胞分选
1.将分选柱放置在分选器的磁场中。
2.将分选柱中加入适量缓冲液，充分湿润分选柱。（xM:500 μL；xL: 3 mL）
3.将细胞悬液加到分选柱中。
4.结合磁珠的细胞会被吸附到分选柱上，没有结合的细胞会顺着液体流下来。加适量的缓冲液，待液体全部流尽，再加入适量缓冲液，一共洗3次。收集总流出物。这是未标记的细胞。（xM:3X500 μL；xL:3X3mL）
5.将分选柱从分选器中取出，并将其放在合适的收集管上。
6.加适量的缓冲液到分选柱中，迅速用塞子推下，得到就是磁性标记的细胞。
保存方法
在2-8℃条件下避光保存，请勿冻存。有效期见瓶子标签。
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