新品 | 欣协生物CD8+T细胞分选试剂盒,人
日期:2023-12-26 阅读:
产品描述
欣协生物CD8+ T细胞分选试剂盒,人用于从PBMC中负选出高纯度及较强活性的无污染CD8+ T细胞。该试剂盒可清除CD4+ T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞、血小板、树突状细胞、粒细胞及红细胞。负选获得的人CD8+ T细胞会留在样品中,不含磁珠、无抗体,且形状完整,适用于任何功能检测和应用。
产品信息
使用方法
试剂和仪器要求
1. 缓冲液:含有pH7.2、0.5%BSA和2mM EDTA的溶液。
2. 选择合适的分选柱和分选器,也可以使用半手动的细胞分选平台进行操作。
3. (可选)预分离过滤器用于去除细胞团块。
操作步骤
[一]细胞分选平台磁性标记、分选
1.细胞计数。
2.打开细胞分选平台,进行自动初始化。
3.转到试剂菜单并选择读取试剂。
4.将样品和采集管放入冷藏架。
5.点击分选菜单,从标签子菜单中选择每个样品的名称(将自动选择正确的标记、分选和洗涤方案)。
6.将样本体积输入到体积子菜单中。按Enter键。
7.选择运行。
8.在B位收集富集的CD8+ T细胞就是负选部分。
[二]手动磁性标记
1.准备细胞,并进行细胞计数。
2.每107细胞,用40μL缓冲液重悬。
3.每107细胞加10μL的生物素-抗体混合物。
4.混合均匀,在冰箱(2-8℃)孵育5分钟。
5.每107总细胞加30μL缓冲液。
6.每107细胞加20μL的磁珠混合物。
7.混合均匀,在冰箱(2一8℃)孵育10分钟。
8.继续进行后续的磁性分选。
[三]手动磁性分选
9.将xL柱置于合适的分选器磁场中。
10.用3mL缓冲液冲洗分选柱。
11.将细胞悬液转移到柱子上。收集通过的未标记细胞,代表富集的CD8+ T细胞。
12.用3mL缓冲液清洗分选柱。收集通过的未标记细胞,代表富集的CD8+ T细胞,并与步骤11的流出物合并。
13.(可选)将分选柱从分选器上取出,并将其放在合适的收集管上。将5mL缓冲液加到分选柱上。将柱塞快速地推入柱中,立即冲洗出磁性标记的非CD8+ T细胞。
[四]自动磁性分选
9.细胞分选平台做好准备。
10.按照用户手册中的说明对细胞分选平台进行操作。
11.建议使用Depletes程序。在B位收集富集的CD8+ T细胞就是负选部分。
储存条件
在2-8℃条件下避光保存,请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
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