新品 | 欣协生物人CD45分选磁珠
日期：2023-11-20 阅读：
产品描述
人CD45分选磁珠根据人细胞表面CD45表达从外周血、红细胞或血小板制剂、淋巴组织、肿瘤组织或非造血组织等样本中富集或去除CD45+细胞。CD45抗原在除红细胞、血小板及其前体细胞外的所有造血来源细胞上表达。超顺磁纳米微珠表面用抗人CD45单克隆抗体进行标记，形成磁性纳米颗粒。预先偶联到纳米珠上的CD45抗体可以与细胞表面表达CD45的靶细胞结合。细胞/珠混合悬浮液被加载到分选柱上，当使用分离缓冲液冲洗CD45细胞时，纳米珠标记的CD45+细胞被保留在柱内，并在清洗步骤中富集。去除磁场后，目标CD45+细胞可以很容易地从柱中洗脱。
应用场景
通过去除CD45+白细胞，从母体外周血中预富集胎儿有核红细胞。
通过去除CD45+白细胞，从外周血、骨髓或淋巴组织中富集上皮肿瘤细胞。
搭配使用CD235a（糖原a）磁珠，从人骨髓中富集多能干细胞。
产品信息
操作步骤
1. 材料准备
1.1 分选缓冲液（PBS溶液，pH7.2，0.5%BSA and 2mM EDTA，2-8°C）
1.2 缓冲液
1.3 分选柱
1.4 分选磁铁
2. 样本制备
当使用抗凝外周血时，应采用密度梯度离心法分离PBMC。
当使用组织样本时，应采用标准的制备方法制备细胞悬液。
3. 磁性标记
3.1 细胞计数.
3.2 细胞悬液、300×g、10min离心，弃上清。
3.3 在每10⁷总细胞在80µL缓冲液中重悬细胞悬液。
3.4 每10⁷总细胞加入20µL CD45磁珠。
3.5 混匀细胞悬液和磁珠，在冰箱中孵育15分钟(2-8°C)。
3.6 洗涤，每10⁷细胞加入1-2mL缓冲液清洗细胞，300×g离心10分钟。弃上清。
3.7 500µL的分选缓冲液多重悬10⁸细胞
4. 分选
注：以SophMag® xL Columns细胞分选柱为例（货号：51-02-0009），其余规格分选柱所需试剂用量见产品说明书。
4.1 取一根全新的分选柱置于对应配套的磁铁中。
4.2 取1mL分选缓冲液缓慢加入分选柱中，润湿分选柱内部，期间避免气泡产生和进入分选柱内部，直至分选柱后一滴液体流出。
4.3 在分选柱下放置新的试管，取操作步骤3准备的细胞悬液，缓慢加入分选柱内，等待细胞悬液后一滴流出。
4.4 取操作步骤4.3细胞悬液的试管加入3mL分选缓冲液，并充分混匀，然后加入分选柱内，直至后一滴流出。
4.5 重复操作4.4操作3次。
4.6 后加入5mL分选缓冲液于分选柱内，取出分选柱使用分选柱配套的活塞推出分选柱内目的细胞于新的试管里面。
4.7 根据下游应用对应处理。如需鉴定纯度需尽快完成。
保存方法
避光保存于2-8°C。不可冷冻储存。有效期见瓶身标签。
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