新品 | 欣协生物Annexin V-647/PI细胞凋亡检测试剂盒
日期:2023-11-20 阅读:
产品描述
Annexin V-647/PI细胞凋亡检测试剂盒可通过标记早期凋亡细胞(远红)和坏死细胞(红色),使用流式细胞仪或其他荧光检测设备快速简便地检测细胞凋亡水平。
Annexin V可选择性结合磷酯酰丝氨酸(Phosphatidylserine,简称PS)。在细胞发生早期凋亡时,PS外翻到细胞膜外侧。用远红色荧光探针647标记的Annexin V,即Annexin V-647,可以结合外翻的PS,从而检测细胞凋亡的重要特征。欣协生物的647染料与普通荧光素相比,荧光亮度更高,且不受环境中pH的影响,具有良好的光稳定性。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种DNA结合染料,它可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞的细胞核。PI可以由488,532或546nm的激光激发,呈现红色荧光。
光谱特性
Annexin V-647: Abs/Em = 650/665 nm
PI: Abs/Em = 535/617 nm (with DNA)
产品信息
操作步骤
以利用星形孢菌素诱导Jurkat细胞凋亡为例:
1. 流式细胞检测
1) 根据实验要求诱导细胞凋亡。
2) 收集细胞。
3) 用PBS洗涤细胞。
4) 加入Annexin V-647和PI工作液。
5) 室温避光孵育。
6) 加入PBS或1×结合缓冲液,尽快通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况。
2. 荧光显微镜检测
1) 在盖玻片或载玻片小室中接种细胞。
2) 根据实验要求诱导细胞凋亡。
3) 用PBS洗涤细胞。
4) Annexin V结合缓冲液中加入Annexin V-647和PI。
5) 培养板中加入染液覆盖全部细胞,室温避光孵育。
6) 用1×结合缓冲液清洗细胞。
7) 将孵育有细胞的盖玻片置于载玻片上。
8) 荧光镜下观察细胞。
保存方法
蓝冰运输。4℃避光保存,有效期 12 个月。
注意事项
1.本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2.荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
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