新品 | 欣协生物人NK细胞分选试剂盒
日期:2023-11-01 阅读:
产品描述
人NK细胞分选试剂盒专为从人PBMC中无损伤分离NK细胞开发。通过使用生物素偶联抗体和NK细胞微珠混合物对非NK细胞,即T细胞、B细胞、干细胞、树突状细胞、单核细胞、粒细胞和红细胞,进行磁性标记并去除,即可分离获得高纯度的NK细胞。
由于使用NK细胞表面分子直接对NK细胞进行标记的分离试剂盒可能会干扰下游研究,本产品所分离获得的NK细胞可用于NK细胞增殖或细胞毒性和细胞溶解活性的诱导研究,NK细胞“自我/非自我”辨别的分析,NK细胞中穿孔素、克里梅和细胞因子表达的研究,以及NK细胞表面受体的功能作用分析。
产品信息
操作步骤
1. 材料准备
1.1 分选缓冲液(PBS溶液,pH7.2,0.5%BSA and 2mM EDTA)
1.2 缓冲液
1.3 分离柱
1.4 分选磁铁
2. 磁性标记
2.1 细胞计数.
2.2每10⁷总细胞在40µL缓冲液中重悬细胞悬液。
2.3 每10⁷总细胞加入10µL NK细胞生物素偶联抗体混合物。
2.4 混合均匀,在冰箱中孵育5分钟(2-8°C)。
2.5每10⁷总细胞加入30µL缓冲液。
2.6每10⁷总细胞加入20µL NK细胞微珠混合物。
2.7混合均匀,在冰箱中孵育10分钟(2-8°C)。
2.8 留待后续磁性分选。
3. 分选柱准备
注:以SophMag® xL Columns细胞分选柱为例(货号:51-02-0009),其余规格分选柱所需试剂用量见产品说明书。
3.1 取一根全新的分选柱置于对应配套的磁铁中。
3.2 取1mL分选缓冲液缓慢加入分选柱中,润湿分选柱内部,期间避免气泡产生和进入分选柱内部,直至分选柱后一滴液体流出。
3.3 在分选柱下放置新的试管,取操作步骤3准备的细胞悬液,缓慢加入分选柱内,等待细胞悬液后一滴流出。
3.4 取操作步骤3.3细胞悬液的试管加入3mL分选缓冲液,并充分混匀,然后加入分选柱内,直至后一滴流出。
3.5 重复操作4.4操作3次。
3.6 后加入5mL分选缓冲液于分选柱内,取出分选柱使用分选柱配套的活塞推出分选柱内目的细胞于新的试管里面。
3.7 根据下游应用对应处理。如需鉴定纯度需尽快完成。
保存方法
避光保存于2-8°C。不可冷冻储存。有效期见瓶身标签。
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本产品搭配我司SophMag®手动磁分选套装,效果更佳。
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