分享 | 解救实验室灰姑娘：高效细胞分选的心动选手来了！（文末有福利）
日期：2023-07-31 阅读：
在童话故事中，恶毒的继母为了阻拦灰姑娘参加王子的舞会，将豌豆倒进灰堆里，要求灰姑娘将豌豆全都挑拣出来。而在现实世界，生物学家们所面对的研究样本往往也是多种细胞的混合物，只有将关注的特定种类细胞分选出来，才能够在细胞水平上研究分析细胞的特性、功能和相互作用。
譬如，生物学家希望研究特定类型的肿瘤细胞来确定可能的药物靶点或治疗方案，然而，从肿瘤患者身上获得的组织样品中并不只含有该种肿瘤细胞，而是混合着大量的其他细胞。如果直接对混合细胞样本进行实验，那么得到的实验结果就会掺杂许多来自其他类型细胞的干扰信息，无法准确地了解所关注的肿瘤细胞的真实特性。因此，生物学家们必须需要将“豌豆”从“灰堆里”分离出来。
伴随着细胞治疗技术的快速发展，人们也格外关注细胞治疗产品的生产工艺对其治疗效果的深刻影响。以CAR-T细胞疗法为例，T细胞的分选和激活就是过程中非常关键的工艺环节，比如在分选步骤中不能收集到足够的T细胞，或是未能将粒细胞、红细胞、抗凝剂等杂质去除，都将会在后续过程中影响病毒转导效率，导致批次间差异，终损害产品的临床效果。另外，还有文献表明[1]，相比于未分选的T细胞，由特定亚群的T细胞生产的CAR-T产品的抗肿瘤效应更强。
常用的细胞分选方法主要分为流式分选和磁珠分选两大类。流式分选需要使用荧光染料或抗体对细胞表面的特定分子进行标记，随后使被标记的细胞依次通过微细管道，接受激光束的照射，流式细胞仪依据收集到的细胞荧光信号和散射信号数据，利用电荷和斥力，或是利用压力和微细流体完成对目标细胞与非目标细胞的分离。
然而，流式分选方法对设备及操作人员的要求较高，且分选过程对细胞刺激较大，对分选出的细胞的活性会有所影响。在20世纪70年，操作更为简单、对细胞影响几乎可以忽略的磁珠分选逐渐发展起来。
磁珠分选的基本原理是，结合有抗体的免疫磁珠能够与表达相应抗原的细胞产生结合，当样品缓慢经过磁场时，结合了磁珠的细胞就会被磁铁吸附，从而与未与磁珠结合的细胞发生分离。磁珠分选具有高灵敏度、高纯度、易操作、对细胞刺激小等优势，但如果采用传统的手工开放式操作，不仅周期长，结果稳定性差，而且容易引入污染风险，因此，选择封闭式的自动化磁珠分选平台已成为一种必然的趋势。
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参考文献：
[1]Turtle CJ, Hanafi LA, Berger C, et al. CD19 CAR-T cells of defined CD4+:CD8+ composition in adult B cell ALL patients. J Clin Invest. 2016 Jun 1;126(6):2123-38. doi: 10.1172/JCI85309.
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