检测原理
本方法采用一步酶联免疫ELISA法。 含有CHOK1 HCP 的样品可以与 HRP 标记的山羊抗 CHOK1抗体以及包被在酶标板上抗CHOK1抗体同时反应, 终形成一种夹心复合物的固相抗体 -HCP- 标记抗体。 通过清洗酶标板可以去除未结合的抗原抗体。 向孔中加入TMB底物充分反应后, 加入终止液后停止显色, 用酶标仪读取反应溶液在 450/650nm处的OD或吸光值。 OD值或吸光值与溶液中的HCP含量成正比。 据此可以根据标准曲线计算出溶液中的HCP浓度。
试剂盒组分
序号 | 试剂盒组分 | 96孔 | 配制 |
1 | 反应板 | 8孔×12条 | 即用型 |
2 | 标准品(0.01mg/mL) | 0.05mL | 按瓶签标识进行稀释 |
3 | 检测抗体(100×) | 0.12mL | 按瓶签标识进行稀释 |
4 | 酶结合物(100×) | 0.12mL | 按瓶签标识进行稀释 |
5 | 稀释液 | 50mL | 即用型 |
6 | 浓缩洗涤液 10× | 50mL | 按瓶签标识进行稀释 |
7 | 显色剂(避光) | 12mL | 即用型 |
8 | 终止液 | 6mL | 即用型 |
9 | 封板膜 | 4 | 即用型 |
10 | 自封铝箔袋 | 1 | 即用型 |
11 | 说明书 | 1 |
储存条件
1.未开封试剂2~8℃保存, 有效期12个月。
2.试剂开封后2~8℃保存且需要在6周内用完, 其中开封的反应板务必连同干燥剂保存于自封铝箔袋中。
检测性能
1.检测范围: 0.7-100ng/mL。
2.检出限: ≤0.3ng/mL。
3.低定量限: 0.7ng/mL。
4.精密度: 批内变异系数(CV) ≤10%, 批间CV≤15%(低定量限的CV≤20%) 。
5.准确度: 回收率80%~120%(低定量限回收率70%~130%) 。
6.特异性: 100ng/mL毕赤酵母和E.coil HCP测值低于0.3ng/mL。
注意事项
1.不同批次试剂盒不建议混用。
2.样品应澄清, 不溶性沉淀应离心去除。
3.样品首次测定时, 建议通过梯度稀释确定小稀释倍数。
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