产品描述
本品为 Alexa Fluor 594 标记的鬼笔环肽, 可发出高亮度、 稳定的红色荧光, 染色反应特异性强, 对比性高, 适合用作 F-actin 的定性和定量检测。 与 Actin 抗体比较, Alexa Fluor 594 鬼笔环肽具有如下优点: (1)与 actin 亚单位一比一结合, 并且不与 G-actin 结合, 具有比 Actin 抗体更好的染色效果。 (2)且本品的结合没有物种差异性, 适用性广泛。 (3)鬼笔环肽标记的非特异性信号可忽略, 因而图像的反差较好。 (4)染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容, 包括荧光蛋白、 纳米晶体和其他 Alexa Fluor偶联物(包含 Alexa Fluor 偶联二抗)。 (5)经本品结合后的 F-actin 仍能维持 actin 自身具有的许多生物学特性。
Ex(nm) : 590
Em(nm) : 618
分子量: 约 1600
溶剂: DMSO
产品信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
Alexa fluor 594 标记鬼笔环肽(红色) | 91-07-0005 | 300 T |
运输与保存
蓝冰运输。 -20℃避光干燥保存, 有效期 12 个月。 【注】 : 避免反复冻融。
使用方法
1. 准备 1× Alexa Fluor 594 标记鬼笔环肽工作液
吸取 1 μL 1000×Alexa Fluor 594 标记鬼笔环肽存储液到 1 mL 含有 1% BSA 的 PBS 缓冲液中即可得到1×工作液。
2. 细胞染色步骤
(1) 细胞培养过夜或更长, 使其密度达到 50~60% 汇合度。
(2) 吸掉培养液, 37℃ 预热的 1×PBS(pH 7.4) 清洗细胞 2 次。
(3) 使用含有 3-4% 甲醛的 PBS 溶液进行细胞固定, 室温固定 10~30 min。
(4) 室温条件下, 用 PBS 清洗固定好的细胞 2~3 次, 每次 10 min。
(5) (可选) : 室温条件下, 用溶于 PBS 的 0.1% Triton X-100 溶液透化处理 3~5 min, 从而增加其通透性。
(6) 室温条件下, 用 PBS 清洗细胞 2~3 次, 每次 10 min。
(7) 每孔加入 Alexa Fluor 594 标记鬼笔环肽工作液 100 μL /孔(96 孔板) , 室温避光染色 20~90 min,夏季时间相对短些。
(8)用 PBS 清洗细胞 3 次, 每次 5 min, 去除掉多余的 Alexa Fluor 594 标记鬼笔环肽。
(9) (可选) : 加入足量的即用型 DAP I 溶液对细胞核进行复染, 如: 100 μL /孔(96 孔板) , 室温 3~5min。 用 PBS 清洗细胞 2 次, 每次 5 min。
(10) 于荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察, 选择 Alexa Fluor 594 激发/发射滤片和/或DAP I 激发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm) 。
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