产品描述
本品为Alexa Fluor 555标记的鬼笔环肽,可发出高亮度、稳定的橘色荧光,染色反应特异性强,对比性高,适合用作F-actin的定性和定量检测。与Actin抗体比较,Alexa Fluor 555鬼笔环肽具有如下优点:(1)与actin亚单位一比一结合,并且不与G-actin结合,具有比Actin抗体更好的染色效果。(2)且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。(3)鬼笔环肽标记的非特异性信号可忽略,因而图像的反差较好。(4)染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容,包括荧光蛋白、纳米晶体和其他Alexa Fluor偶联物(包含Alexa Fluor偶联二抗)。(5)经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。
Ex(nm):556
Em(nm):574
分子量:约1300
溶剂:DMSO
产品信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
Alexa fluor 555标记鬼笔环肽(橘色) | 91-07-0002 | 300T |
运输与保存
蓝冰运输。-20℃避光干燥保存,有效期12个月。【注】:避免反复冻融。
使用方法
1.准备1×Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽工作液
吸取1μL 1000×Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽存储液到1mL含有1% BSA的PBS缓冲液中即可得到1×工作液。
2.细胞染色步骤
(1)细胞培养过夜或更长,使其密度达到50~60%汇合度。
(2)吸掉培养液,37℃预热的1×PBS(pH7.4)清洗细胞2次。
(3)使用含有3-4%甲醛的PBS溶液进行细胞固定,室温固定10~30min。
(4)室温条件下,用PBS清洗固定好的细胞2~3次,每次10min。
(5)(可选):室温条件下,用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化处理3~5min,从而增加其通透性。
(6)室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min。
(7)每孔加入Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽工作液100μL/孔(96孔板),室温避光染色20~90min,夏季时间相对短些。
(8)用PBS清洗细胞3次,每次5min,去除掉多余的Alexa Fluor 555标记鬼笔环肽。
(9)(可选):加入足量的即用型DAP I溶液对细胞核进行复染,如:100μL/孔(96孔板),室温3~5min。用PBS清洗细胞2次,每次5min。
(10)于荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择Alexa Fluor 555激发/发射滤片(Ex/Em=556/574nm)和/或DAP I激发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm)。
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