Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒
91-05-0002
产品描述
本试剂盒为Annexin V与PI联合使用的试剂盒，用于检测细胞凋亡早期的发生，可区分凋亡早期凋亡细胞和晚期凋亡或坏死细胞。
Annexin V为胞内蛋白膜联蛋白家族成员，以钙离子依赖的方式选择性与磷脂酰丝氨酸(PS)结合。PS正常分布在细胞膜内侧。PS外翻到细胞膜外是不同类型的细胞在凋亡早期的明显特征，用带有FITC标记的Annexin V，即Annexin V-FITC，可通过流式细胞仪或荧光显微镜检测到这一重要特征。FITC呈现黄绿色荧光。
PI（Propidium Iodide，碘化丙啶）是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，在嵌入DNA后释放红色荧光。PI不能穿透完整的细胞膜，但可以穿透坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞。
Annexin V-FITC与PI联合使用时，PI被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（AnnexinV+/PI-）外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC和PI结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。
FITC大吸收波长和激发波长分别为494nm和518nm，PI-DNA复合物的大吸收和发射波长分别为535nm和617nm。
产品信息
货号 | 名称 | 规格 |
91-05-0002 | Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒 | 100T |
产品组分
产品组成 | 91-05-0002 |
Annexin V-FITC | 500μL |
Propidium iodide | 1mL |
Binding Buffer(1×) | 50mL*2 |
运输保存
蓝冰运输。4℃避光保存，有效期24个月。【注】：不可冷冻。
使用说明
以利用星形孢菌素诱导Jurkat细胞凋亡为例。
1.流式细胞检测
1）根据实验要求诱导细胞凋亡。
2）收集细胞。
3）用预冷的PBS洗涤细胞两次，离心收集细胞并用1×结合缓冲液重悬细胞。
4）加入FITC-Annexin V和PI工作液。
5）室温避光孵育。
6）加入PBS或1×结合缓冲液，尽快通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况。
2.荧光显微镜检测
1）在盖玻片或载玻片小室中接种细胞。
2）根据实验要求诱导细胞凋亡。
3）用PBS洗涤细胞。
4）Annexin V结合缓冲液中加入FITC-Annexin V和PI。
5）室温避光孵育。
6）用1×结合缓冲液清洗细胞。
7）将孵育有细胞的盖玻片置于载玻片上。
8）使用合适的滤光片在荧光显微镜下观察细胞。
注意事项
1.本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
2.荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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