产品描述
来源:经基因编辑的小鼠子宫肌瘤细胞
制剂:达尔伯克改良伊格尔培养基和50µg/mL庆大霉素。标准型-基质胶适合所有的培养基。
储存:储存在-20℃时是稳定的。通过分装并一次性使用分装物来小化产品的冻融。在-20℃冰箱中储存分装物直到准备使用。请不要储存在无霜冰箱中。请保持产品的冻结。
有效日期:标准型-基质胶的有效日期是批次特异的,在-20℃条件下能储存24个月以上。
警告:因为标准型-基质胶在10℃以上会开始凝胶化,所以标准型-基质胶和所有的进入与标准型-基质胶接触的培养皿或培养基都应该预冷。在实验的全过程中请保持标准型-基质胶处于冰上。
在标准型-基质胶冻融的过程中可能会发生颜色的变化,由于二氧化碳和碳酸氢盐缓冲液以及酚红的作用,颜色会从淡黄色变化到深红色。颜色的变化是正常的,不会影响产品的功效,颜色将会在5% CO2平衡下消失。请将小瓶淹没在冰中并放置在4℃冰箱里过夜解冻。一旦被解冻,请涡旋小瓶以确保材料的均匀分散。涡旋请全程保持在冰上。请使用无菌技术处理。请将解冻的基质胶放置在无菌的区域,在小瓶的顶部喷洒70%的乙醇并风干。
使用预冷的移液管轻柔的吸取基质胶以确保其均匀性。将基质胶分装到离心管中,每当基质胶堵塞吸头和/或移液管测量不精确时请更换吸头。如果将材料放置在4℃的冰上24-48个小时,凝胶化的基质胶可能会被重新水化。
基质胶可以被用来作薄层凝胶(0.5mm),细胞可以接种在其顶部。当作为1mm凝胶层使用时,细胞也可以在基质胶的内部培养。大量的稀释将会导致1个薄的、非凝胶化的蛋白层。这对于细胞附着是有用的,但是在分化研究中可能不起作用。
产品信息
货号 | 名称 | 规格 |
91-02-0131 | 标准型-基质胶 | 10ml |
使用说明
包被涂层方法:
基质胶可以以几种方式使用。薄层凝胶法适用于在凝胶顶部接种细胞,厚层凝胶法允许您在三维基质内培养细胞,薄层包被法(不凝胶化)给您提供了复杂的蛋白质层,您可以在其上培养细胞。您的选择基于您想要实现的终结果,无论是细胞生长、附着还是分化。
注:为了维持凝胶化的一致性,我们推荐不要将基质胶稀释到少于3mg/mL。请使用冰冷的无血清培养基来稀释基质胶。通过在冰上移液管上下吸液或涡旋小瓶来混合。
●薄层凝胶法
1.依照推荐的方法解冻基质胶。使用预冷的移液管,将基质胶混合至均匀。
2.将培养板放置在冰上,以50µl/cm2向生长表面加入基质胶。
3.将培养板放置在37℃,30分钟。
4.如果有必要的话,请在使用无血清培养基轻柔漂洗前吸出未结合的材料。请确保移液器的吸头不要刮擦包被的表面。培养板现在可以使用了。
●薄层包被法
1.依照推荐的方法解冻基质胶。使用预冷的移液管,将基质胶混合至均匀。
2.使用无血清培养基将基质胶稀释到需要的浓度。对于您的应用程序,您应该完成以经验为主的研究来确定您的适包被浓度。
3.向被包被的容器中加入稀释的基质胶。加入的量应该足以容易地覆盖整个生长表面。在室温下培养1个小时。
4.吸出未结合的材料并使用无血清培养基轻柔地漂洗。培养板现在可以使用了。
●厚层凝胶法
1.依照推荐的方法解冻基质胶。使用预冷的移液管,将基质胶混合至均匀。
2.将培养板放置在冰上。向基质胶中加入细胞并使用预冷的移液管悬浮。以150-200µl/cm2向生长表面加入基质胶。
3.将培养板放置在37℃,30分钟。现在可以添加培养基了。细胞也可以培养在这一凝胶的顶部。
细胞复苏
使用细胞复苏溶液在冰上7小时内解聚基质胶能够实现将生长在基质胶上的细胞有效地复苏,或者使用中性蛋白酶,考虑到连续培养,中性蛋白酶作为一种金属酶可以分散细胞。
注意事项
因为基质胶在10℃以上会开始凝胶化,所以基质胶和所有与基质胶接触的培养皿或培养基都应该预冷。产品需要放置于冰上,并在2℃-8℃的冰箱中或者冷室中过夜融化,蛋白浓度高时可能需要更多时间。在实验的全部过程中请保持基质胶处于冰上。
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