产品介绍
XinBio人淋巴细胞分离液是葡聚糖和液影酸钠混合液达到特定的比重,通过离心分层获得纯化的单核细胞淋巴细胞。
分离原理:血液中单独核细胞和淋巴细胞,其容积、形状和溶解度与别的细胞不一样,淋巴细胞分离液是某种密度接近1.075∽1.090 之间而近似于等渗的溶液,用它做密度梯度离心,使一定密度的细胞按相对密度梯度分布,进而将各类血细胞多方面分离。
成份:主要为多聚糖,泛影酸钠
形状:本品为透明澄清液体,微乳光,无肉眼可见不溶物
密度:1.077±0.001g/mL
渗透压:290±15mOsm
用途:用于分离提取人外周血或脐带血中的单个核细胞
贮藏条件及有效期: 4-30°C 避光保存,禁止冻存。有效期24个月。
使用时的短暂光照对本品的影响可忽略不计,但在每次使用后,应尽快放回避光处保存。
产品货号
货号 | 名称 | 规格 |
91-01-0001 | 人淋巴细胞分离液 | 200 ml/瓶 |
使用方式
1. 将分离所用的缓冲液与本品均恢复至室温。
2. 用离心管收集血液,并与等量的生理盐水,Hanks 液或不含钙镁的PBS 混匀(血液不稀释亦可)。
3. 取15mL 离心管,加入3mL 本品,并将2 步骤中的稀释血液缓缓铺加到本品的上层。注意:铺加血样时建议速度适中,尤其是刚开始时的铺加, 避免破坏淋巴细胞分离液与血样的界面。
4. 室温下,800g 离心20min。
5. 离心后,离心管由上到下分为4 层:血浆层-白膜层-人淋巴细胞分离液层-红细胞与粒细胞的沉淀。不用弃去上层液体, 用巴斯德管小心吸取白膜层至另一新的离心管中。
注意:由于样本之间的差异,有的血样离心后,仍有部分的红细胞以及粒细胞残留在分离液层中,无法沉淀完全,因此用巴斯德管吸取白膜层的细胞时,尽量少吸取到分离液层中的液体。
6. 用10mL生理盐水,Hanks 液或不含钙镁的PBS重悬获得的PBMC,300g,离心10min。
7. 重复操作步骤 6 一次,沉淀即为 PBMC。
注意事项
1. 本品对光敏感,将本品持续暴露在光照中会使泛影酸钠中的碘离子分离,影响分离效果,但日常的使用过程中,这种影响可忽略不计。
2. 若本品储存于冰箱中,那么需将本品恢复至室温后使用。
3. 血样的新鲜程度与分离效果关系密切,为了获得佳的分离效果与细胞活性,好在取血后2h内进行分离操作,血样的存放时间越长,分离效果越差。
4. 由于样本之间的差异,为了获得佳的分离效果,可能需要调整离心力与离心时间,但通常离心力大不超过1000g。
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