产品描述
骨髓抑制细胞(MDSCs) 是未成熟骨髓细胞的异质群体, 表征为 CD11b + Gr-1 +, 具有诱导 T 细胞功能障碍的能力。 它们出现在各种病理状态(癌症, 感染, 自身免疫疾病) 中, 其中未成熟骨髓祖细胞分化成粒细胞, 巨噬细胞或树突细胞被部分阻断。 MDSCs 的活化会导致免疫抑制因子精氨酸酶 1和 iNOS、 活性氧(ROS) 和一氧化氮(NO) 的产生增加, 从而影响 T 细胞的增殖能力、 诱导 T 细胞凋亡或导致 T 细胞无反应。
使用骨髓抑制细胞分选试剂盒分选出的 MDSCs 抑制 T 细胞功能的能力是通过在 BALB/c 和C57BL/6 小鼠中分别使用 CT26、 4T1、 MCA203 和 EL-4 肿瘤模型来测定的。
骨髓抑制细胞分选试剂盒是为分离多核 Gr-1high Ly-6G + 和单核 Gr-1dim Ly-6G - 髓系细胞而开发的。根据标记物 Ly-6C 的表达, Gr-1dim Ly-6G - 细胞可进一步细分为 Gr-1dim Ly-6C high Ly-6G - 细胞和Gr-1dim Ly-6C low Ly-6G - 细胞。 Ly-6Chigh亚群和 Ly-6Clow亚群之间的比例取决于所使用的肿瘤模型。
分选原理
骨髓抑制细胞分选试剂盒是为分选 Gr-1high Ly-6G + 和/或 Gr-1dim Ly-6G - 髓系细胞而开发的。 首先,用 抗 Ly-6G-生物素 (MDSC 试剂盒) 和抗生素磁珠对 Gr-1high Ly-6G + 细胞进行间接磁性标记。 然后, 将细胞悬浮液装入分选柱, 给分选柱置于分选器的磁场中。 磁性标记的 Ly-6G + 细胞被保留在柱内。 未标记的细胞流过分选柱, Gr-1dim Ly-6G - 髓系细胞被预富集。 从磁场中移除分选柱后, 磁性保留的 Gr-1high Ly-6G + 细胞可作为正选细胞部分被洗脱出来。 为了提高纯度, 含有 Gr-1high Ly-6G +髓系细胞的正选细胞部分会在第二个分选柱上分离。 用抗-Gr-1-生物素(MDSC 试剂盒) 和链霉亲和素磁珠(MDSC 试剂盒) 间接磁性标记个流过分选柱中的 Gr-1dimLy-6G-髓系细胞, 并通过正选从预富集的 Gr-1dimLy-6G-髓系细胞部分中分选出来。 磁性标记的 Gr-1dim Ly-6G - 髓系细胞被保留在分选柱上, 从磁场中移除分选柱后再进行洗脱。 为了提高纯度, 含有 Gr-1dim Ly-6G - 髓样细胞的正选细胞部分在第二个分选柱上分离。
产品信息
[组分]
2mL 小鼠抗-Ly-6G-生物素(MDSC 试剂盒) : 生物素标记的 Ly-6G 单克隆抗体(同型: 大鼠 IgG2a)
2mL 小鼠抗-Gr-1-生物素(MDSC 试剂盒) : 生物素标记的 Gr-1 单克隆抗体(同型: 大鼠 IgG2b)
2x2mL 抗生物素磁珠: 偶联生物素单克隆抗体(同型: 小鼠 IgG1) 的磁珠
2mL 链霉亲和素磁珠(MDSC 试剂盒) : 偶联链霉亲和素的磁珠
1mL 小鼠 FcR 阻断试剂
[规格]
可分选 2× 109 个细胞总量, 多达 20 次分离。
[保存形式]
所有组分储存在含有稳定剂和 0.05% 叠氮化钠的缓冲液中。
储存条件
2 - 8 °C 避光保存, 请勿冻存。 有效期见试剂外标签。
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