检测原理
为了使用小鼠IFN-y分泌测定法分析鼠抗原特异性T细胞,用特异性肽、蛋白质或其他抗原制剂在短时间内重新刺激小鼠脾细胞或其他含有单细胞制剂的白细胞。
随后,将干扰素-v特异性捕捉剂附着到所有白细胞的细胞表面。然后将这些细胞在37°C下培养一小段时间,以允许细胞因子的分泌。分泌的干扰素-y结合于阳性分泌细胞上的干扰素-y捕捉剂。随后用第二种干扰素-v特异性抗体:干扰素-y检测抗体与R-藻红蛋白(PE)偶联,标记这些细胞,用于流式细胞仪的灵敏检测。
分泌干扰素-y的细胞可以用超纯的抗PE磁珠进行磁性标记,并在分选柱上进行浓缩。磁性标记的细胞保留在分选柱中,而未标记的细胞穿过。在柱从磁场中移除后,磁性标记的细胞可以被洗脱为阳性选择的细胞部分,富含分泌细胞因子的细胞。这些细胞现在可以用于细胞培养或分析。由于对活细胞进行了分析,因此可以通过排除死细胞来小化非特异性背景。这提高了的分析灵敏度。
产品信息
[组分]
1mL 小鼠IFN-yCatch Reagent:抗IFN-y单克隆抗体(ratlgG1)与细胞表面特异性单克隆
抗体(ratlgG2b) 偶联。
1 mL 小鼠 IFN-y检测抗体:与PE(R-藻红蛋白偶联的抗IFN-y单克隆抗体(同种型:rat lgG1) 。
1mL 抗PE磁珠:磁珠与鼠抗PE单抗(同型:小鼠IgG1)偶联。
[规格]
50次检测,总计107细胞数。
[保存形式]
所有组分均保存在含有稳定剂和0.05%叠氮钠的溶液中。
储存条件
在2-8℃条件下避光保存,请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
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