TCRγ/δ+ T细胞分选试剂盒，人(92-01-0089)
92-01-0089
产品信息
[组分]
2mL TCRγ/δ+ T细胞生物素抗体混合物，人:生物素偶联的单克隆抗人抗体混合物，针对TCRγ/δ+ T细胞不表达的抗原。
2ml 抗生物素磁珠:与抗生物素单抗偶联的磁珠(同型:小鼠IgG1)。
[规格]
可分选109总细胞数，多达100次分选。
[保存形式]
TCRγ/δ+ T细胞生物素抗体混合物保存在含有稳定剂和0.05%叠氮钠的溶液中。
生物素磁珠保存在0.05%叠氮钠的溶液中。
使用方法
[试剂和设备]
缓冲液:含有pH7.2、0.5%BSA和 2mM EDTA的溶液。不建议使用含有钙离子或镁离子的缓冲液。
选择合适的分选柱和分选器，也可以使用自动分选器进行操作。
(可选)预分离过滤器用于去除细胞团块。
(可选)用于流式细胞术分析的荧光标记抗体。
(可选)碘化丙啶溶液或7-AAD用于流式细胞术排除死亡细胞。
[1.样本制备]
使用标准方法从外周血或白膜层中分离单个核细胞(PBMC)。
[2.磁性标记]
1.细胞计数。
2.300Xg离心10min，去除上清。
3.每107细胞，用80μL缓冲液重悬。
4.每107细胞，用20μL生物素抗体混合物混匀。
5.(2-8)℃冰箱避光孵育10min(如果是在冰上孵育，需要增加孵育时间;如果是常温孵育，会
增加非特异结合)。
6.每107细胞加入1-2mL缓冲液洗涤细胞，300Xg离心10分钟。完全吸去上清液。
7.每107细胞，加入80μL 缓冲液。
8.每107细胞，加入20μL 抗生物素磁珠。
9.混合均匀，在冰箱(2-8℃)中孵育15 分钟。
[3.磁性分选]
1.将分选柱放置在分选器的磁场中。
2.在分选柱中加入适量缓冲液，充分湿润分选柱（xM:500μL；xL: 3mL）
3.将细胞悬液加到分选柱中。
4.结合磁珠的细胞会被吸附到分选柱上，没有结合的细胞会顺着液体流下来。加适量的缓冲液，待液体全部流尽，再加入适量缓冲液，一共洗3次。收集总流出物。这是富集的未标记的目的细胞。（xM:3x500μL；xL:3x3mL）
储存条件
在2-8℃条件下避光保存，请勿冻存。有效期见试剂外标签。
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