产品信息
[组分]
1mL CD8+T细胞生物素-抗体混合物,人:CD4、CD15、CD16、CD19、CD34、CD36、CD56、CD123、T细胞受体γ/8和CD235a单抗偶联生物素的混合物。
2mL CD8+T细胞磁珠混合物,人:与抗CD14单抗(同型:小鼠IgG2a)、抗CD61抗体(同
型:小鼠IgG1)、抗生物素抗体(同型:小鼠IgG1)偶联的磁珠混合物。
[规格]
可分选109总细胞数。
[保存形式]
所有组分均保存在含有稳定剂和0.05%叠氮钠的溶液中。
使用方法
[试剂和设备]
缓冲液:含有pH7.2、0.5%BSA和 2mM EDTA 的溶液。
选择合适的分选柱和分选器,也可以使用自动分选器进行操作。
(可选)预分离过滤器用于去除细胞团块。
[1.自动分选仪磁性标记、分选]
1.细胞计数。
2.打开仪器,进行自动初始化。
3.转到试剂菜单并选择读取试剂。用自动分选仪上的条形码扫描仪扫描每个试剂的条形码。将试剂放入试剂架上的适当位置。
4.将样品和采集管放入冷藏架。
5.点击分选菜单,从标签子菜单中选择每个样品的名称(将自动选择正确的标记、分选和洗涤方案)。
6.将样本体积输入到体积子菜单中。按Enter键。
7.选择运行。
8.在位置 B收集浓缩的CD8+T细胞部分是目的细胞。
[2.手动磁性标记]
1.准备细胞,并进行细胞计数。
2.每 107细胞,用40μL缓冲液重悬。
3.每 107细胞加 10μL的生物素-抗体混合物。
4.混合均匀,在冰箱(2-8℃)孵育5分钟。
5.每 107总细胞加30μL缓冲液。
6..每 107细胞加 20μL的磁珠混合物。
7.混合均匀,在冰箱(2-8℃)孵育10 分钟。
8.继续进行后续的磁性分选。
[3.手动磁性分选]
9.将xL 柱置于合适的分选器磁场中。
10.用3mL缓冲液冲洗分选柱。
11.将细胞悬液转移到柱子上。收集通过的未标记细胞,代表富集的CD8+T细胞。
12.用3mL缓冲液清洗分选柱。收集通过的未标记细胞,代表富集的CD8+T细胞,并与步骤11的流出物合并。
13.(可选)将分选柱从分选器上取出,并将其放在合适的收集管上。将5mL缓冲液加到分选柱上。将柱塞快速地推入柱中,立即冲洗出磁性标记的非CD8+T细胞。
[4.自动磁性分选]
9.仪器做好准备。
10.仪器按照用户手册中的说明进行操作。
11.建议使用Depletes程序。在B位收集富集的CD8+T细胞就是阴选部分。
储存条件
在2-8℃条件下避光保存,请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
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