T细胞分选试剂盒II，小鼠(92-01-0113)
92-01-0113
产品信息
[组分]
1mLT 细胞生物素-抗体混合物，小鼠:偶联CD11b，CD11c，CD19，CD45R(B220)，CD49b(DX5)，CD105，MHCII类和Ter-119单抗的生物素混合物。
2mL抗生物素抗体磁珠:与抗生物素单抗偶联的磁珠(同型:小鼠IgG1)。
[规格]
可分选109总细胞数。
[保存形式]
所有组分均保存在含有稳定剂和0.05%叠氮钠的溶液中。
储存条件
在2-8℃条件下避光保存，请勿冷冻。有效期见试剂外标签。
操作步骤
[1.自动分选仪磁性标记、分选]
1.细胞计数。
2.打开仪器，进行自动初始化。
3.转到试剂菜单并选择读取试剂。用自动分选仪上的条形码扫描仪扫描每个试剂的条形码。将试剂放入试剂架上的适当位置。
4.将样品和采集管放入冷藏架。
5.点击分选菜单，从标签子菜单中选择每个样品的名称(将自动选择正确的标记、分选和洗涤方案)。
6.将样本体积输入到体积子菜单中。按Enter键。
7.选择运行。
8.在位置 B收集浓缩的T细胞部分是阴性部分。
[2.手动磁性标记]
1.准备细胞，并进行细胞计数。
2.每 107细胞，用40μL缓冲液重悬。
3.每 107细胞加10μL的生物素-抗体混合物。
4.混合均匀，在冰箱(2-8℃)孵化5分钟。
5.每107总细胞加 30μL缓冲液。
6..每 107细胞加 20μL的抗生物素抗体磁珠混合物。
7.混合均匀，在冰箱(2-8C)孵育10分钟。
8.继续进行后续的磁性分选。
[3.手动磁性分选]
9.将xL柱置于合适的分选器磁场中。
10.用3mL缓冲液冲洗分选柱。
11.将细胞悬液转移到柱子上。收集通过的未标记细胞，代表富集的T细胞。
12.用 3mL缓冲液清洗分选柱。收集通过的未标记细胞，代表富集的T细胞，并与步骤11的流出物合并。
13.(可选)将分选柱从分选器上取出，并将其放在合适的收集管上。将5mL缓冲液加到分选柱上。将柱塞快速地推入柱中，立即冲洗出磁性标记的非T细胞。
[4.自动磁性分选]
9.仪器做好准备。
10.仪器按照用户手册中的说明进行操作。
11.建议使用 Depletes程序。在B位收集富集的T细胞就是阴选部分。
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