人CD45+白细胞分离/去除试剂盒（正选）
91-01-0015
基本信息
产品名称
中文名称：人CD45+白细胞分离/去除试剂盒（正选）
英文名称：Human CD45+ leucocyte isolation/depletion kit（positive selection）
编号
91-01-0015
细胞处理量
用于处理1×109个细胞
分选方法
正选
预期用途
适用于从人外周血、浓缩白细胞来源的单个核细胞等单细胞悬液中分选出CD45+白细胞。
背景信息
CD45为白细胞共同抗原，是一种蛋白质酪氨酸磷酸酶，是受体介导的淋巴细胞活化所必需的。由于外显子4、5、6的不同剪接模式，形成了CD45RA、CD45RB、CD45RC以及CD45RO。CD45正常表达见于所有造血细胞（成熟红细胞及其前体细胞除外）。单核细胞的表达强度高于中性粒细胞，而嗜酸粒细胞则与单核细胞的表达强度相似；T、B淋巴细胞高表达。扁桃体浆细胞和IL6分泌增高导致的反应性浆细胞均可表达CD45，但在正常骨髓中的浆细胞则为弱表达；肥大细胞亦可表达CD45。本产品能够从新鲜或冻存的外周血单个核细胞中简便快捷的分选/去除绝大多数的CD45+白细胞。能够处理的总细胞量为1×109，为基础和临床研究使用/去除CD45+白细胞提供一个有力的工具。
试剂盒组成
成份名称 | 物理性状 | 规格 | 数量 |
CD45生物素化抗体 | 无色透明液体 | 200μl/支 | 1支 |
链霉亲和素磁珠 | 棕色混悬液 | 500μl/支 | 1支 |
细胞分选缓冲液 | 无色透明液体 | 500ml/瓶 | 1瓶 |
操作步骤
一 单个核细胞的提取
分离外周血单个核细胞(推荐使用欣协生物快速单个核细胞分离管，货号91-01-0002)，详细使用方法参见单个核细胞分离管说明书。
二 CD45+白细胞分离/去除详细步骤（正选）
图1. FLOSEP细胞分离示意图
1.往PBMC中加入适量（推荐每1×108cells使用50ml）预冷的细胞分选缓冲液用以洗涤PBMC，300g离心8min；
2.弃上清，加入适量预冷的细胞分选缓冲液，将PBMC浓度调整为1×108cells/ml，冰浴或4°C预冷5min；
3.以20μl生物素化抗体/ml PBMC的比例将生物素化抗体加入PBMC中，用移液枪轻柔吹打20次或涡旋震荡5S，充分混合后置于4°C孵育15min；
4.孵育完毕后，加入细胞分选缓冲液，300g离心8min；
5.弃上清，使用细胞分选缓冲液将PBMC浓度调整为108/ml；
6.以50μl磁珠/ml PBMC的比例将链霉亲和素磁珠加入到PBMC中，用移液枪轻柔吹打20次混匀，室温静置孵育10min；
7.孵育完毕后，加入2.5ml细胞分离缓冲液混匀后使用磁极磁吸3min收集/去除未被磁吸液体；
8.重复步骤7一到两次；
9.将收集细胞加入适量（推荐每1×108cells使用50ml）预冷的细胞分选缓冲液300g离心8min去上清，所得沉淀即为目的细胞即可用于下游分析及应用。
400-863-1188
地址：苏州市吴江区龙桥路1368号青禾创客1楼及3楼
邮箱：info@szxxbio.com
Copyright © 苏州欣协生物科技有限公司 版权所有
苏ICP备2022038876号
